Brucella Antasubstaint ELISA Kit

Sonraíocht

 

Nósanna imeachta agus léirmhíniú tástála

 

Céim 1 Nós Imeachta Tástála

1.1 Ullmhú réiteach níocháin

Wtiúchan orking wleacht leacht:Sula n -úsáidtear é, ba cheart an tuaslagán níocháin a athchóiriú go teocht an tseomra ({20-25 céim) agus é a chroitheadh ​​go cothrom chun é a dhéanamh aonfhoirmeach. Ansin caol 20 uair an tuaslagán níocháin tiubhaithe le huisce íonaithe (mar shampla, cuirtear tuaslagán níocháin 5ml tiubhaithe le huisce íonaithe 95ml), meascadh go maith, agus is féidir an leacht níocháin caolaithe a stóráil ag céim 2-8 ar feadh 7 lá.

1.2 Ullmhú Samplach

① Tógadh an fhuil ainmhí, a lártheifníodh ag 4000rpm ar feadh 10 nóiméad, agus bailíodh supernatant. Is féidir serum a théamh go nádúrtha freisin gan hemolysis.

② Nuair a bhíonn méid an tsampla mór, chun a chinntiú go bhfuil an t -am imoibriúcháin turgnamhach comhsheasmhach. Measc an sampla serum leis an tuaslagán oibre antasubstainte ag 1: 1 sa phláta caolaithe (70UL sampla serum {+ 70 tuaslagán oibre antasubstainte UL). Tá an rialú diúltach agus an rialú dearfach mar an gcéanna leis an sampla serum.

1.3 Nós Imeachta Tástála

① Is féidir an microplate lipéad einsím a dhéanamh (de réir líon na samplaí, a dhí -chomhdhlúthú agus a úsáid arís agus arís eile), dhá thobar a chur ar bun le haghaidh rialuithe diúltacha agus dearfacha, cuir 100ul den mheascán réamh -mheasta leis an microplate lipéad einsíme. Déan an sampla a chroitheadh ​​go réidh sa tobar, ag baint úsáide as an scannán pláta ina saothraítear rónta chun an pláta a chlúdach, agus goir ag 37 céim ar feadh 30 nóiméad.

② Oscailt an scannán pláta ina saothraítear rónta, croith an tuaslagán sa phláta go maith, cuir 300µl de leacht tiúchana oibre le gach tobar, agus ansin cuir an leacht sa tobar ar leataobh. Déan na céimeanna thuas arís 5 huaire, agus ar deireadh thiar tirim ar pháipéar glan glan.

③Dcomhchuingeach einsíme iled:Caolaigh an einsím comhchuingeach (50 ×) 50 uair (mar shampla: 20Ul Enzyme comhchuingeach comhchruinnithe + 980 ul Diluent 1, ríomhtar an méid sonrach atá ag teastáil de réir líon na samplaí tástála), meascadh go maith agus cuir ar leataobh é.

④Add 100µl de einsím comhchuingeach le gach tobar, clúdaigh an pláta, agus déan é a ghoradh ag 37 céim ar feadh 30 nóiméad.

⑤ Pláta einsím a chur ar leataobh, is ionann an oibríocht shonrach agus an méid thuas ②.

⑥Add tuaslagán foshraithe 100µl ar gach tobar, clúdaigh an pláta agus déan é a ghoradh ar feadh 10 nóiméad ag 37 céim ar shiúl ón solas.

⑦Add tuaslagán stopadh 50µl ar gach tobar, agus an toradh a chinneadh laistigh de 5 nóiméad.

 

Céim 2 Léiriú Toradh

 

Léadh luach OD450 gach tobair ar an léitheoir microplate 96- go maith.

2.1 Bailíochtú

 

Ba é an meánluach OD45 0 nm de rialú dearfach ná <0.35 agus bhí an meánluach OD450Nm de rialú diúltach/rialú dearfach níos mó ná nó cothrom le 3.5, bhí na torthaí turgnamhacha bailí. Seachas sin, ba cheart an tástáil a athdhéanamh.

2.2 modh ríofa

I gcás gach sampla, ríomh an PI (Blockingr ith) mar seo a leanas ag baint úsáide as na luachanna samplacha ceartaithe agus rialaithe:

2.3 Léiriú Torthaí

Nuair a bhíonn PI <20%, meastar go bhfuil sé diúltach.

Nuair a bhíonn pi> 30%, meastar go bhfuil sé dearfach.

Nuair a bhíonn 20% níos lú ná nó cothrom le PI níos lú ná nó cothrom le 30%, meastar go bhfuil sé amhrasach, agus moltar é a athdhéanamh agus tástáil a dhéanamh seachtain amháin ina dhiaidh sin.

Clibeanna Te: Brucella Antasubstaint ELISA Kit, an tSín Brucella Antasubstaint Soláthraithe Kit Elisa, monaróirí, monarcha